肉汤琼脂培养基的制作过程和原理
肉汤培养基是常用的液体培养基,也是制备常用的细菌分离培养基及其他某些培养基的基础。
材料:牛肉、蛋白胨、氯化钠、水(蒸馏水或自来水)、比色管、蒸馏水、10%碳酸氢钠、10%醋酸、0.02%酚红指示剂、吸管等。
制作过程:
1、取新鲜瘦牛肉,除去脂肪及筋膜,切成小块后并用绞肉机绞碎,每500g碎牛肉加水1000ml,混合后置4℃冰箱过夜。
2、次日取出煮沸半小时左右,使肉渣全部凝固,加热过程中不时地用玻璃棒搅拌,以免沉底,也可以不放置冰箱过夜,直接煮沸1小时。
3、用纱布过滤,弃去肉渣(肉渣中的液体应尽量挤净),于滤液中加入1%蛋白胨及0.5%氯化钠,加热溶解,并补足失水至1000 ml 。
4、冷至50℃左右,用精密pH试纸测酸碱度,用校正pH为7.6左右;过碱时,可用10%醋酸校正之。
5、分装于试管中或三角烧瓶中,15磅(121℃)高压蒸气灭菌20~30min,备用。
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