琼脂糖凝胶怎么配制
琼脂糖凝胶的配制是分子实验室比较基本的操作,因此正确地操作对整个实验来讲很有必要,大体流程如下:称量、熔胶、倒胶、拔梳。
1、称量 我们通常所说的0.8%、1%的胶都是指的质量体积分数,即所称取的琼脂糖粉的质量克比所加的TBE缓冲液的体积毫升即胶的浓度。缓冲液的体积根据胶板的大小而定。如小胶板0.8%的胶需要琼脂粉0.104克,TBE13毫升;
2、熔胶 将所称量的琼脂粉与TBE在锥形瓶中混合,在微波炉内反复加热2到3次至琼脂粉溶解并无气泡;
3、倒胶 干净的胶槽内摆好梳子,往胶内滴加1uL左右核酸染料,混匀,待冷却至不烫手,轻轻倒入胶板内。
4、拔梳待大约20分钟后,轻轻拔掉梳子若不好拔,可以滴加适量的TBE缓冲液。
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