红豆杉树怎样提取紫杉醇
紫杉醇是红豆杉中主要活性成分,是萜类环状结构的天然次生代谢衍生物。因其含量低、结构类似物较多、纯度要求高、分离过程中易转化等因素,给提取、分离和测定带来了较大的困难。如何以低成本和简单的工艺提取紫杉醇,将紫杉醇与其类似物分离,获得纯度较高的紫杉醇产品,并对其进行精确的测定就成为研究的重点。
常用的提取方法有:甲醇有机溶剂萃取法、乙醇有机溶剂萃取法等。萃取又可分为初级萃取和次级萃取,在这两级萃取过程中,溶剂的选择具有重要影响。
常用的纯化方法有:正相柱色谱法和反相色谱法主要包括常压和低压柱层析、干柱层析等法,以及一些较先进的分离手段如高速逆流色谱等。
目前有关紫杉醇类物质的提取方法,大多采用有机溶剂对红豆杉原料多次浸提,浸提液回收后再用有机溶剂萃取,再经层析分离后结晶得到紫杉醇。这些方法存在最大问题是提取收率低且设备昂贵,并且造成了巨大的资源浪费,提高了生产成本,存在较大环保问题。
具体提取步骤为:
取红豆杉原料研磨过100至200目筛,向其中加入5至10倍量的水及百分之零点一的冰醋酸,加纤维素酶于超声下酶解2至5小时;加入等体积的有机溶剂,超声萃取0.5至2小时;静置过滤分液,水相用有机溶剂萃取2到3次,合并有机相;减压除去有机溶剂,所得浸膏与等质量中性氧化铝拌样,过200至300目硅胶或氧化铝层析柱,石油醚和乙酸乙酯洗脱除去脂溶性杂质,再以醇与乙酸乙酯混合液洗脱,监测,收集醇与乙酸乙酯流份;减压除去醇与乙酸乙酯,所得粗品依次经弱碱性树脂柱和强碱性树脂柱,二氯甲烷与丙酮混合液洗脱,得到纯品;纯品再经重结晶精制。-
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